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肝纤维化形成的实验研究

2013-11-19 10:18:36 来源:中华肝病网 浏览:1315

  目的:观察pcDNA3.0-白细胞介素10(IL-10)真核表达质粒电穿孔转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肝纤维化的治疗效果。

  方法:分离纯化大鼠BMSCs,并进行4,6-二脒基-2-苯基吲哚标记;将60只雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,每组20只。采用皮下注射四氯化碳(CCl4)方法建立肝纤维化模型。A组、B组大鼠在造模的同时分别尾静脉注射pcDNA3.0-IL-10-BMSCs和BMSCs细胞悬液1ml,其细胞密度为1×106 个/ml, 每周2次,共8 周;C组大鼠尾静脉注射1 ml磷酸盐缓冲液。8 周后处死大鼠,取肝组织:冰冻切片,观察标记细胞;Masson染色观察纤维化情况;Western blot检测IL-10表达量;ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量;碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)含量。使用SPSS13.0统计软件包进行方差检验,各实验组间两两比较采用q检验。

  结果:CCl4诱导8 周后,Masson染色显示模型鼠大部分形成中度以上肝纤维化;标记的细胞在A组、B组肝组织中均被观察到;纤维化评分和HYP含量:C组分别为(3.15 ± 0.96)μg/mg和(1.89 ± 1.03)μg/mg、A组分别为(1.01 ± 0.35)μg/mg和(0.73 ± 0.29)μg/mg、B组分别为(1.34 ± 0.65)μg/mg和(1.21 ± 0.78)μg/mg,大鼠的肝纤维化程度A组和B组比C组明显减轻,A组比B组程度轻,q值分别为-10.02、-5.01、8.21、4.82和-4.73,P值均<0.01, 差异有统计学意义;TNF-α含量在A组为(275.21 ± 86.35)pg/mg、B组为(321.76 ± 98.49)pg/mg、C组为(476.23± 126.43)pg/mg,A组和B组均低于C组,A组低于B组,q值分别为 -12.86、-8.96和-7.43,P值均<0.01,差异有统计学意义。

  结论:应用pcDNA3.0-IL-10-BMSCs能有效抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维。

  原题:白细胞介素10基因修饰的骨髓间充质干细胞抑制大鼠肝纤维化形成的实验研究

  作者:涂云忠 张坚 刘慧萍 余卫

  来源:《中华肝脏病杂志》订阅热线 023-63706512 邮发代号 78-56

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