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转移消失蛋白B基因表达对MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响

2011-01-19 08:49:21 来源:中华肝病网 浏览:2779

转移消失蛋白B基因表达对MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响

黄修燕  黄自丽  许永华  黄新余  周俭  叶胜龙  汤钊猷  郑起

【摘要】 目的  观察慢病毒载体携带靶向人源性MTSS1(转移消失蛋白B基因,MIM-B基因)小干扰RNA对人肝癌细胞株MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响。 方法  构建靶向MTSS1基因的慢病毒载体-siMTSS1,转染MHCC97H细胞。实时荧光定量PCR和Western blot用于测定MIM-B mRNA和蛋白表达;侵袭实验用于评估侵袭潜能;明胶酶谱用于检测基质金属蛋白酶2(MMP2)活性。以MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,第14天将24只成模裸鼠随机分成空白对照组、空载体组及治疗组(每组8只),在超声引导下瘤周及瘤内多点注射硼酸盐缓冲液、Lenti-GFP及Lenti-siMTSS1,第35天检测肺转移情况。采用SPSS13.0统计软件对计量资料进行方差分析。 结果  成功构建慢病毒载体携带的针对MTSS1基因小干扰RNA,Lenti-siMTSS1感染效率为97.0%,显著抑制MIM-B蛋白表达,下调MMP2活性。体外实验结果显示空白对照组、空载体组和干扰组细胞穿膜数分别为37.9±4.4、37.4±5.3和26.6±4.6(F=26.695, P<0.01)。体内实验结果显示空白对照组、空载体组及治疗组肺转移结节数分别为6.5±2.6、6.4±2.7和3.8±1.3(F=3.637, P<0.05);肿瘤组织MIM-B mRNA相对表达量分别为0.39±0.19、0.38±0.10和0.16±0.11(F=11.644, P<0.01)。 结论  慢病毒介导小干扰RNA抑制MIM-B mRNA和蛋白表达进而抑制HCC侵袭、转移潜能可能与下调MMP2活性相关,为肝癌患者提供一条新的分子靶向治疗思路。
【关键词】癌,肝细胞; 侵袭; 转移; 转移抑制基因1; 转移消失蛋白B

稿件来源:中华肝脏病杂志,2010,18(12):915-919

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